电动匀浆机匀浆时匀浆介质最少需要多少

人逝花落空2023-09-09 03:49:33我要评论

电动匀浆机匀浆时匀浆介质最少需要多少,第1张

匀浆机操作时有哪些注意事项?

1. 先将刀轴和机轴配合好,后将连接器弹簧性元性向下移动至尺槽内,(向下移足与台阶碰牢)机器才好运转。

2. 开机之前,注意电源与电机上的电压是否相符。

3. 碳刷经常要检查,如太短要更换新碳刷,如发现碳刷火花不正常应立即停止使用,检查障碍原因,修理好后方可使用,以免整流器和线圈烧坏。

4. 由于电机转速高,如连续使用会使电机烧坏,因此使用时间以三分钟为限,停止5分钟后方可使用。

5. 玻璃杯装置时需与机上圆轴心对准,居中,四面无摇动,方可开机。

6. 机器不宜空转,使用时必须放入少量液体或油脂。

7. 放入物料时须缓缓加入,先开慢档,后开快档,但慢档只能作起步作用,不宜常用。

组织匀浆制备时因注意哪些事项?

1、取组织块(0.2g~1g)最少可到2~5mg,在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,称重,放入5或10ml的小烧杯内

2、用移液管量取预冷的匀浆介质(ph7.4,0.01mol/L Tris-HCL, 0.0001MOL/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖0.8%的氯化钠溶液)或者用0.86%冷生理盐水,匀浆介质或生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍,用移液管或移液器取总量的2/3的匀浆介质或生理盐水于烧杯中,用眼科小剪尽快剪碎组织块(天然时操作要在冰水浴中进行,将盛有组织的小烧杯放入冰水中).

3、匀浆的方式有多种:手工匀浆、机器匀浆、超声匀浆、反复冻融.

手工匀浆:将剪碎的组织倒入玻璃匀浆管中,再将剩余的1/3匀浆介质或生理盐水冲洗残留在烧杯中的碎组织块,一起倒入匀浆管中进行匀浆,左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,使组织匀浆化.

机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000r/min上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间.

超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用40安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次.

反复冻融:培养或者分离的细胞可以用以上的方法匀浆,也可以反复冻溶3次左右(即让细胞加适量的低渗液或者双蒸水放低温冰箱中结冰,溶解,再结冰,再溶解,反复3次左右),但有部分酶活力会受影响.

取少量组织匀浆做涂片(直接涂片、染色均可),显微镜下观察细胞是否磨破,若没有破则可以延长匀浆时间或增加冻融次数.

4、将制备好的10%匀浆用普通离心机或低温低速离心机3000r/min左右离心10~15分钟,若检测ATP酶,则只需要1000转/分,离心5分钟,将离心好的匀浆留下上清弃下面沉淀.

根据你的实验需要,取适量上清夜进行各种测定.

来自百度文库

电动匀浆机使用说明及原理

其原理是鼓风机驱动空气,经过低、中效的过滤器后,通过工作台面,使实验(5)组织匀浆器:超声组织及细胞破碎器,用其进行样品的分离提纯实验。 (

【求助】请问有做过大鼠动脉匀浆测SOD,MDA的吗?

请教各位战友

我现在正准备作大鼠动脉匀浆测氧化应激指标,SOD ,MDA。有以下几个问题:

急需指教?我也没做过动脉匀浆,但做过其它的脏器的,我就我的经验说说,

1,一般来说,应该有0.5~1g左右,

2,建议用电动的匀浆器,估计动脉管韧性强,不好匀浆。一般用生理盐水作为匀浆液。需要注意的是,匀浆时应在冰水浴上进行。

3,可以的,一般是3~5倍体积的生理盐水。我做过脑部匀浆,组织和生理盐水1:9比例,冰上匀浆,其实玻璃手动的就可以了hanmeimei456 wrote:请教各位战友

我现在正准备作大鼠动脉匀浆测氧化应激指标,SOD ,MDA。有以下几个问题:

3 血管这么细,这么少,能匀浆出东西来吗?急需指教?我的硕士论文中有动脉匀浆部分,也有SOD和MDA指标的内容。

1:你的意思应该是大鼠胸主动脉。一般来说如果取的合适,能取15mm的胸主动脉,我一般都是把一半用于组织离体培养,另一半用于测定氧化指标。

2:其实匀浆机非常简单,常州电机厂有种简单的电动机,只需要在上面接上金属棒然后用胶带固定,再把研磨棒用胶带固定于其表面,研磨即可。桌面放置一冰浴铁盒,必须让你的研磨磨砂玻璃瓶充分在其冰浴体系内部,否则高速研磨下,如果自然环境下酶迅速被分解失活了!关于冰的制备,就是找个塑料盆放在大冰柜中过夜,第二天拿来,把底部向上放置,用自来水一冲,部分融化,然后把盆一提,呀,冰掉出来了,然后提起来,扔在地上,呀,冰就成碎片了!然后放到盆里,你不用管那些冰受到污染了啥的,污染不污染没关系,我就受不了别人做个试验不必要的也小心翼翼的。

所以匀浆,当然电动的,不过是半自动,因为你手还需要不停旋转。匀浆液当然要用生理盐水了,自己配备即可,0.9%,真正实验室用都是自己配。一定要分三次加入,按照血管称重的重量,配成5% 的,或者按你需要,你会发现很少的生理盐水,还要分三次加入,肯定要有一些损失的。

3:当然能匀浆出东西了!酶本身就少,又不是脂肪那么多。

ps:注意一些要点,如不注意,你实验可能失败。

4:冷冻离心机是非常必要的,如果没有条件,那就低速,常温离心,不过不推荐。酶常温暴露活性会降低,而且高速旋转,离心机的轴摩擦产生热量,而且离心时本身分子运动产生热量,加速酶降解。

5:你应该建立了心血管疾病模型,然后一边做血管实验一边做酶活性的吧?或者你采取血管离体损伤液模拟培养?那你取血管的时候,称重比例就要仔细斟酌,而且培养的天数也会有变化,因为你试验会发现,一只动物 模型光取血管就弄死,实在太浪费,而且你导师不一定允许,就需要从血管的药物peuiyang 浓度和天数上下功夫,长度不够,就从深度上扩。

研磨管要准备多个,洗完用生理盐水多次冲洗,研磨前将血管组织剪碎以减少研磨需时,研磨过程中随时注意不要转速过快,不要形成泡沫,注意转速和控温。

实验进程和步骤要提前设计好表格,否则容易出现失误。暂时就这些

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